Из иммунодиагностических методов наиболее чувствительны, информативны и предпочтительны РНГА, ИФА. Применение методов и реакций, выявляющих специфические антигены к менингококковой инфекции в биологическом материале, увеличивает правильность диагностического подтверждения этиологического фактора до 70–80 %. А также позволяет провести идентификацию возбудителя внутри вида, определить серогруппу менингококка. Но в настоящее время определить серогруппу менингококка недостаточно (различные генетические различия менингококков часто обусловливают предпосылки к эпидемической опасности возбудителя, а также эпидемические особенности в случае существования опасности возникновения эпидемии). По большей части это применительно к менингококку серогруппы В с ее разнообразными эпидемиологическими тенденциями.
Таким образом, важное значение в плане прогнозирования эпидемиологической диагностической ценности при различных клинических формах менингококковой инфекции. Менингококковыделительство (бактерионосительство, менингококковый назофарингит) выявляют при использовании бактериологического и иммунодиагностических методов, когда материалом для изучения является мазок с зева, из гортани, носоглотки.
Главным при менингококковом назофарингите является подтверждение менингококковой этиологии, так как назофарингиты чаще всего бывают вирусными. В диагностике генерализованных форм большое значение имеют бактериологическое и иммунологическое исследования крови и ликвора (спинномозговая жидкость).
3. Исследование ликвора начинают со спинномозговой пункции. Исследование жидкости проводят по общим принципам – исследование органолептических свойств (прозрачность, цвет), микроскопия, биохимия, бактериологический посев, а также исследуют давление ликвора в спинномозговом канале. Состояние ликвора в норме: давление – 100–200 мм вод. ст., прозрачный, бесцветный, микроскопически: лимфоциты – до 5 в 1 мкл, белок – 0,1–0,3 г/л, биохимически выявляют сахар: его норма – 1/2 от показателя сахара в крови, хлориды – 7–7,5 г/л или 100–130 ммоль/л.
При менингите ликвор мутный, давление повышено. Под микроскопом – синдром клеточно-белковой диссоциации с нейтрофильным плеоцитозом (резкое увеличение количества клеток, в данном случае нейтрофилов, при незначительном увеличении белка). Такая ликворная картина характерна для гнойных нейроинфекций.
Биохимия ликвора – сахар и хлориды уменьшены. Бактериологическим методом выявляют менингококк.
4. В гемограмме при менингококкемии выявляют умеренный или высокий нейтрофильный лейкоцитоз (20–60 × 109/л и более) со сдвигом лейкоцитарной формулы влево, отсутствие эозинофилов, увеличение СОЭ (50–70 мм/ч). Нередко – тромбоцитопения. Обнаруживаются резкие расстройства гомеостаза – метаболический ацидоз, коагулопатия потребления, уменьшение фибринолитической активности крови и др.
5. В моче обнаруживают изменения, характерные для синдрома "инфекционно-токсической почки", – протеинурия, цилиндрурия, микрогематурия. Кроме того, молниеносная менингококкемия может дать анурию – отсутствие мочи (синдром "шоковой почки"). Плохой и неблагоприятный для жизни синдром.
Трансмиссивные инфекции (инфекции, возбудитель которых передается человеку через переносчика)
Малярия
Малярия – инфекция, вызванная простейшим организмом – одноклеточным малярийным плазмодием, характеризующаяся периодами лихорадки, одышкой, связанной с анемией, гепатоспленомегалией. Переносчики заболевания – самки комара из рода Anopheles.
В основе дополнительных методов исследования лежит лабораторная диагностика. Обследуют кровь, мочу.
1. Исследование гемограммы . Обнаруживают в начале заболевания лейкопению с нейтрофильным сдвигом влево, а в последующие дни фиксируют уменьшение числа эритроцитов, снижение уровня гемоглобина, увеличение числа ретикулоцитов, лейкопению с относительным лимфомоноцитозом, тромбоцитопению, увеличение СОЭ анизопойкилоцитоз.
2. При исследовании мочи выявляют оксигемоглобин, метгемоглобин, гематин, частички гемоглобина, белок, эритроциты, гиалиновые и зернистые цилиндры. Очень часто гемоглобинурия встречается у людей с генетически детерминированной энзимопатией – дефицитом Г-6-ФДГ, обусловливающей уменьшение резистентности эритроцитов.
3. Диагноз подтверждается выявлением малярийных паразитов в препаратах крови – толстой капле и мазке . Для проведения этих методов используют капиллярную (из пальца) или венозную кровь. Кровь берут вне зависимости от цифр температуры.
При одноразовом негативном результате нельзя исключить диагноз малярии, и проводят повторное исследование через 8-12 ч. Выявить плазмодии легче в толстой капле крови, которая дает возможность в одном поле зрения микроскопа просмотреть большой объем крови. А дифференцировать вид возбудителя легче удается в мазке.
Необходимо учесть количественную и качественную характеристику результатов паразитологического обследования. Выраженная паразитемия (10 и более паразитов в одном поле зрения толстой капли крови, или более 100 × 109/л плазмодиев в 1 л крови, или поражение более 5 % эритроцитов) или выявление промежуточных стадий развития плазмодия чаще всего свидетельствуют о тяжелом течении тропической малярии с риском развития коматозной или иной злокачественной картины болезни.
Туляремия
Туляремия – преимущественно трансмиссивная особо опасная инфекция, характеризующаяся полиорганным поражением, обязательно лимфоаденитом, интоксикацией, лихорадкой. Заболевание – зооноз. Существует около 80 видов животных, способных быть источником инфекции. При этом в инфицировании может участвовать кровососущий переносчик (причем самый разнообразный – иксодовые клещи, комары, слепни, блохи и т. д.).
Для диагностики заболевания наряду с эпидемиологическим анамнезом, осмотром, исследованием периферической крови как подтверждение диагноза используют лабораторные методы исследования.
1. В общем анализе крови в начале болезни отмечаются умеренный или нормолейкоцитоз со сдвигом формулы влево, ускорение СОЭ. В последующие дни гематологические изменения выражены более итенсивно: лейкопения со сдвигом влево, лимфоцитоз и моноцитоз, СОЭ увеличена. При гнойных осложнениях картина гемограммы существенно меняется.
При генерализованной форме туляремии СОЭ ускорена до 50 мм/ч. В общем анализе крови отмечается умеренно выраженный лейкоцитоз со сдвигом формулы влево. Иногда бывает лимфо– и моноцитоз.
2. Бактериологический метод . Посев проводят на желточные или агаровые среды с добавлением цистеина, кроличьей дефибрированной крови и прочих питательных веществ. На желточную среду сеют кусочки печени, селезенки (взятые от животных), лимфатического узла и кровь для получения культуры возбудителя.
Получение и идентификацию возбудителя туляремии необходимо проводить в специально оборудованных лабораториях отделов особо опасных инфекций с использованием всех правил техники безопасности.
3. Биологический метод . Лучшим объектом для заражения являются белые мыши и морские свинки, так как они из всех лабораторных животных имеют повышенную чувствительность к туляремии. Заражают пунктатом бубонов, соскобом со дна язвы, смешанным с физиологическим раствором, отделяемым конъюнктивы и кровью (5–6 мл). Материал вводят лабораторным животным подкожно или внутрибрюшинно. Инфицированные животные погибают от туляремии максимум через две недели.
4. Из методов иммунодиагностики чаще всего применяют реакцию агглютинации с использованием туляремийного диагностикума. Результат считается положительным при титре 1: 100. Чувствительнее показала себя РНГА, причем она может применяться как для ранней, так и для ретроспективной диагностики. При этом антигеном является туляремийный эритроцитарный диагностикум.
5. Аллергическая диагностика . Кожно-аллергическая проба с туляремийным антигеном (тулярином) является ранним и очень ценным методом диагностики. Результаты реакции можно увидеть с 3-5-го дня болезни.
Чума
Чума – особо опасная инфекция, послужившая причиной гибели более 230 млн человек. Возбудитель – Yersinia pestis поражает лимфатические узлы, легкие, быстро проникает в организм, вызывая сепсис, серозно-геморрагические воспаления любой локализации в короткое время. Основной путь передачи – трансмиссивный (передача происходит от больного животного, чаще – грызуна, через укус блохи – человеку), а также воздушно-капельный – основной при эпидемиях.
Диагностика
Диагностика возбудителя чумы представляет трудности при выявлении спорадических случаев, которые могут давать эпидемические вспышки чумы. Развитие лихорадки, лимфаденита, пневмонии у лиц, находящихся в эпидемиологически опасном для чумы районе, требует исключения у таких лиц чумы.
Большую роль в диагностике чумы занимают методы лабораторной диагностики (бактериоскопический, бактериологический, серологический), которые должны осуществляться в специальных лабораториях, в которых должны быть соблюдены инструкции о режиме работы противочумных учреждений.
Для лабораторной диагностики чумы исследуют следующие материалы: пунктаты из бубона; содержимое везикул, пустул, карбункулов; отделяемое из язв; мокроту; материал из зева; отечную жидкость; кровь; мочу; рвотные массы. Кроме того, возбудителя можно обнаружить даже в воздухе, где побывал больной. При необходимости исследуют патологоанатомический материал: кусочки органов, взятых от трупов людей, верблюдов, грызунов.
1. Проведение экспресс-метода дает возможность предварительной постановки диагноза, о положительных результатах которого свидетельствуют специфическое свечение микробных тел при применении метода флюоресцирующих антител, присутствие в препаратах овоидных биполярно окрашенных палочек. Потом необходимо осуществлять дальнейшие мероприятия для выделения возбудителя.
2. Микробиологический метод . Все исследования, связанные с работой с патологическим материалом и выделением возбудителя, осуществляются в специальных лабораториях в защитных костюмах. При первичной бактериоскопии мазков обнаруживаются грамотрицательные овоидные биполярно окрашенные палочки. Обнаруженные данные не позволяют поставить окончательный диагноз.
3. Необходимо проведение биологического метода , который заключается в заражении и гибели зараженных морских свинок и белых мышей после введения исследуемого материала.
4. В лабораторной диагностике чумы часто применяются серологические методы: РНГА, РТНГА , при этом обнаружение признаков возбудителя не представляет трудности.
Сибирская язва
Сибирская язва – особо опасная инфекция, зооноз, характеризующаяся попаданием возбудителя (Bacillus anthracis) на кожу, слизистые оболочки, появлением серозно-геморрагического воспаления кожи, лимфатических узлов. Заболевание протекает в виде кожной формы – с образованием специфического карбункула или септической формы. Согласно классификации Громашевского сибирская язва относится к инфекциям наружных покровов.
Диагностика сибирской язвы проводится на основании клинико-эпидемиологических и лабораторных данных, не исключено применение инструментальных методов.
Методы лабораторной диагностики включают бактериоскопический, бактериологический и иммунологический методы.
1. Микробиологическая диагностика является основным методом. Заключается в получении возбудителя, культуры возбудителя из патологических материалов больного. Целью метода является идентификация возбудителя, используя полученные данные о его морфологических, культуральных, тинкториальных свойствах. В качестве материала для микробиологического исследования при кожной форме сибирской язвы можно использовать содержимое везикул и карбункулов. При септической форме материалом являются мокрота, рвотные массы, испражнения, кровь. Любые работы, осуществляемые с патологическим материалом больных особо опасными инфекциями или даже с культурой возбудителя, должны осуществляться в специальных лабораториях при полном соблюдении правил работы. Сначала проводят бактериоскопию мазков, определяя морфологические и тинкториальные свойства возбудителя – крупной, грамположительной, неподвижной палочковидной бактерии, спорообразующей, имеющей истинную капсулу (образует ее не только в организме человека и животного, но и на специальных питательных средах).
Проводят посев, изучая культуральные свойства. Возбудители сибирской язвы хорошо растут на простых питательных средах. В МПА (мясопептонный агар) появляются шероховатые колонии формы буквы R. Под малым увеличением микроскопа края колоний похожи на голову медузы или гриву льва.
2. Биологические методы – заражение лабораторных животных с дальнейшим исследованием на них течения болезни.
3. Методы иммунодиагностики . Для выявления антигена в исследуемом материале применяют РИФ и реакцию преципитации Асколи с диагностической преципитирующей сибиреязвенной сывороткой. Сущность этой реакции – сибиреязвенная сыворотка содержит антитело, специфичное только для антигена сибиреязвенной бациллы. При контакте они реагируют, образуя преципитат (осадок). С целью ранней диагностики часто применяют иммунофлюоресцентный метод, который раньше всех других методов может дать положительный результат. Но ненадежен и требует подтверждения другими методами.
4. Метод диагностики с использованием аллергической реакции – внутрикожная проба с антраксином (аллерген из сибиреязвенных бацилл). Положительный результат – уже на 4– 5-й день болезни. Препарат вводят внутрикожно (0,1 мл). Результат получают через 24 и 48 ч. Положительной является реакция при наличии гиперемии и инфильтрата более 10 мм в диаметре, если реакция не исчезла через 48 ч.
5. Возможно исследование мокроты . При септической форме выделяется пенистая кровянистая мокрота, что говорит о развитии пневмонии. Все виды воспаления при сибирской язве – серозно-геморрагические. Септическая форма развивается нечасто, но прогноз при этом неблагоприятный и почти всегда заканчивается летально (развитие инфекционно-токсического шока, геморрагического отека легких). При этом характерный признак – мокрота свертывается в виде вишневого желе. В крови и мокроте при септической форме появляется большое количество сибиреязвенных бацилл, определяемых лабораторно.
6. Изменения в легких в виде пневмоплеврита будут определяться рентгенологически в виде массивных затемнений легочной ткани. Такая картина характерна для септической формы и также свидетельствует о неблагоприятном прогнозе.
Гельминтозы
Гельминтозы – заболевания человека, в основе которых лежит паразитарное отношение червей к человеческому организму. В данном случае всех червей, имеющих такую возможность, называют гельминтами. Науке известно более 250 видов гельминтов. Наиболее часто встречаемые гельминтозы, вызываемые классами – круглыми, ленточными червями и классом сосальщиков.
Гельминтозы, вызванные круглыми червями (нематодами)
Аскаридоз – тонкокишечный гельминтоз, вызываемый аскаридой – крупной нематодой (самка – до 40 см, самец – до 30 см). Относится к так называемым геогельминтозам (на определенном этапе развития червь должен попасть в почву). Механизм передачи – фекально-оральный. Данный гельминтоз является антропонозом, т. е. единственный источник инфекции – человек, в тонком кишечнике которого паразитирует аскарида, способная к репродукции.
Диагностика . Данный гельминт получил широкое распространение из-за несоблюдения людьми личной гигиены и часто малосимптомного течения. Таким образом, в диагностике аскаридоза данных физикальных методов исследования недостаточно и всегда необходима лабораторная диагностика с целью подтверждения диагноза или профилактического обследования людей.
1. В общем анализе крови на ранней фазе инвазии наблюдается эозинофилия (увеличение количества эозинофилов). В норме – 0,5–5 % (0,02-0,3 × 109/л), увеличение может быть незначительным, и в дальнейшем с течением заболевания картина крови приобретает нормальный вид.
2. В мокроте таких больных можно обнаружить личинки аскарид. Это связано с миграцией личинок аскарид по сосудистому руслу в легкие и способностью проникать через альвеолы в бронхиальное дерево.
3. Кал на яйца глистов . В хронической фазе инвазии определяющим в диагностике является обнаружение в кале яиц гельминта. Диагностика не представляется сложной при отхождении гельминтов с фекалиями.
4. Иногда, когда клубок гельминтов занимает значительный объем тонкой кишки, поставить диагноз помогает рентгенологическое исследование кишечника . На снимке в таком случае отчетливо виден патологический участок затемнения. Можно только заподозрить наличие гельминтов. Для подтверждения аскаридоза необходимо исследование кала, так как особь, достигшая рентгенопозитивных размеров, является половозрелой и кал на яйца аскарид обязательно даст положительный результат.
5. Разрабатывались методы выявления в моче летучих жирных кислот , выделяющиеся аскаридами в процессе жизнедеятельности.
6. Существуют иммунологические реакции с антигенами , приготовленными из личинок, что упрощает обследование и позволяет выявить аскаридоз на любой стадии.
Энтеробиоз – кишечный гельминтоз, вызываемый острицей (самка – до 12 мм, самец – до 4 мм), паразитирующей в дистальном отделе тонкой кишки, толстой кишке. Единственный источник инвазии – больной человек, т. е. заболевание – антропоноз. Механизм передачи – фекально-оральный, возможна аутоинвазия (попадание яиц своих же гельминтов повторно).
Заболевание широко распространено на всем земном шаре.
Диагностика . Возбудителей часто можно обнаружить на поверхности фекалий. Это связано с характером поведения самок в период откладывания яиц – они мигрируют в прямую кишку и даже могут выползать на поверхность, оставляя яйца на перианальной области больного, которые затем благополучно распространяются и попадают в пищеварительный тракт нового хозяина. При обнаружении особи гельминта на поверхности фекалий необходимости в дальнейшем обследовании нет. Самым лучшим и простым способом выявления яиц гельминтов является снятие их с перианальной области с помощью липкой полиэтиленовой ленты или полихлорвиниловой пленки. Затем проводят микроскопию полученных материалов безо всякой их подготовки. При отсутствии яиц остриц можно с уверенностью говорить об отсутствии энтеробиоза, что не исключает возможности инвазии в ближайшее время при несоблюдении правил гигиены.
Гельминтозы, вызванные гельминтами класса ленточных червей (тениидозы)
Дифиллоботриоз – кишечный гельминтоз, вызванный одним из 10 видов лентецов, но чаще всего причина гельминтоза – широкий лентец. Заболевание – зооноз, заражение человека происходит при поедании зараженной, неправильно приготовленной рыбы, обитающей в пресноводных водоемах. Дифиллоботриоз характеризуется развитием аутосенсибилизации и мегабластической анемии.
Клиника данного гельминтоза неспецифична, и поэтому требуются дополнительные методы исследования.