Кровь стабильна при 4–8 °C в течение 2–3 суток.
Микробиологические исследования
Общими требованиями к процедуре отбора и транспортировки проб являются:
1) знание оптимальных сроков для взятия материала на исследование;
2) взятие материала с учетом места максимальной локализации возбудителя, путей выделения в окружающую среду;
3) отбор материала для исследования в необходимом и достаточном объеме с обеспечением условий, исключающих контаминацию проб;
4) по возможности – взятие материала до применения антибиотиков и других химиотерапевтических препаратов или после отмены антибиотиков через 2–3 дня;
5) материалы, подлежащие бакобследованию, собирают в стерильную посуду, снабжают этикеткой с фамилией обследуемого и наименованием материала. В сопроводительном документе-направлении необходимо указать, какое отделение направляет материал, Ф.И.О. и возраст больного, предполагаемый диагноз, антибактериальную терапию, дату и час взятия пробы;
6) материал доставляется проинструктированным медработником в контейнерах, не допуская опрокидывания. При транспортировке не допускается смачивание ватных пробок и замораживание материала;
7) материал доставляется немедленно или в течение 1–2 ч. При невозможности доставки в указанные сроки биоматериал хранят в холодильнике, кроме крови и материала, исследуемого на наличие менингококка. При увеличении времени доставки проб до 48 ч необходимо использовать транспортные среды;
8) доставленные в лабораторию пробы должны быть размещены в специально отведенном месте для приема биоматериала. На работников лаборатории при приеме возлагается контроль за соблюдением правильной доставки образцов;
9) категорически запрещается доставка материала в лабораторию обследуемыми лицами;
10) в случае несоблюдения условий образцы не подлежат обработке, и об этом сообщается лечащему врачу для повторного проведения исследования.Инструкция по взятию исследуемого материала для микробиологических исследований
Кровь
Кровь у больного берут процедурная сестра и лаборант в процедурном кабинете или в палате в зависимости от состояния больного.
Кровь для посева рекомендуется брать по возможности до начала антибиотикотерапии или через 12–24 ч после последнего введения препарата больному.
Посев проводится во время подъема температуры.
Рекомендуется брать кровь 2–4 раза в сутки, при остром сепсисе – 2–3 взятия из различных мест в течение 10 мин.
При наличии у больного постоянного подключичного катетера или капельницы в вене можно воспользоваться ими для получения крови только в течение 3 дней, так как наступает контаминация катетера. Некоторому количеству крови дают свободно стечь в пробирку, затем набирают кровь в шприц для посева. Посев крови производят над спиртовкой.Кровь берется у взрослых в количестве 5-20 мл, а у детей – 1-15 мл и из шприца без иглы над спиртовкой засевается во флаконы с питательной средой в соотношении крови и среды 1:10. Флаконы с кровью доставляются в лабораторию немедленно.
Спинномозговая жидкость
Взятие ликвора проводится как можно раньше, желательно до начала антибиотикотерапии.
Берут ликвор в стерильную пробирку с крышкой в количестве 1–3 мл.
Доставляют в лабораторию, где тотчас, пока ликвор теплый, его подвергают анализу; при отсутствии такой возможности материал сохраняют при температуре 37 °C в термостате в течение 2–3 ч.Во время транспортировки ликвор следует тщательно предохранять от охлаждения. Для этого используют грелки, термос.
Моча
Исследуют, как правило, утреннюю порцию мочи.
До взятия мочи проводится предварительный туалет наружных половых органов.
При мочеиспускании первая порция мочи не используется. Начиная с середины мочеиспускания, моча собирается в стерильную посуду в количестве 3-10 мл, плотно закрывается стерильной пробкой.Желательно доставлять пробы мочи в лабораторию немедленно. При отсутствии такой возможности моча может храниться от момента взятия до начала исследования при комнатной температуре 1–2 ч и не более 24 ч при температуре 4 °C.
Кал
При инфекционных заболеваниях (ОКИ, тифо-паратифозные заболевания, дизентерия) и внутрибольничных инфекциях желудочно-кишечного тракта материал берется с первых часов и дней поступления больного до начала антибиотикотерапии.
Взятие образцов производится минимально 2 раза. Испражнения для посева берут сразу после дефекации. Сбор их осуществляется из судна, горшка, пеленки, тщательно дезинфицированных и многократно отмытых горячей водой. Из посуды кал забирают стерильным шпателем или палочкой в стерильные банки с крышкой, пробирки. В отбираемые пробы включают патологические примеси (гной, слизь, хлопья).
При невозможности получения испражнений материал забирают непосредственно из прямой кишки с помощью ректальных тампонов. Тампон смачивают в физрастворе, вводят на 8-10 см и затем помещают в стерильную пробирку.Кал доставляют в лабораторию не позднее 1–2 ч после сбора. Материал может сохраняться при температуре 2–6 °C 24 ч.
Исследование абсцесса
Исследуют гной, биоптат стенок абсцесса.Исследуемый материал в максимально возможном количестве берется стерильным шприцем и в нем же с закрытой иглой доставляется в лабораторию немедленно либо может храниться в холодильнике 2 ч.
Мокрота
Больной перед откашливанием чистит зубы и полощет рот кипяченой водой. Мокроту собирают в стерильную банку или флакон с крышкой.
Если мокрота отделяется плохо, рекомендуется накануне назначить отхаркивающее или дать больному вдохнуть 25 мл 3-10 %-ного физраствора через распылитель.
Мокрота может храниться 2 ч при комнатной температуре и 24 ч в холодильнике. При сборе мокроты больной не должен собирать слизь, слюну.Мокрота, состоящая из слюны и частиц пищи, не исследуется.
Носоглоточная слизь, гнойное отделяемое миндалин, отделяемое из носа
Взятие материала проводится натощак или не ранее чем через 2–4 ч после еды. Корень языка придавливают шпателем, материал берут стерильным тампоном, не касаясь языка, слизистой щек и зубов.
При исследовании носоглоточной слизи на менингококк пользуются изогнутым стерильным ватным тампоном. Тампон вводят концом вверх за мягкое нёбо в носоглотку и проводят 3 раза по задней стенке.
У больных ангинами при подозрении на дифтерию материал берут с миндалин сухим тампоном. При наличии налетов материал следует брать с границы здоровых и пораженных тканей, слегка нажимая на них тампоном.Материал на сухих тампонах доставляется в лабораторию в течение 2 ч. Материал доставляется в сумках с грелками.
Исследование на коклюш и паракоклюш
Исследуют носоглоточную слизь, носоглоточный смыв, транстрахеальные аспираты.
Фиксируют голову пациента, вводят тампон глубоко в ноздрю, оставляют там на 15–30 с, вынимают и помещают в стерильную пробирку. При сборе материала изо рта тампон вводят за мягкое нёбо, стараясь не задеть язык и миндалины. Снимают слизь с задней стенки глотки, осторожно вынимают тампон, который помещают в стерильную пробирку.
При сборе материала непосредственно на питательные среды материал получают, подставляя вертикально во время кашля больному чашку Петри со средой и держа ее на расстоянии 5-10 см в течение нескольких секунд, чтобы уловить 5–6 кашлевых толчков. Чашку с посевом быстро закрывают крышкой, заворачивают в бумагу и в вату.
Материал доставляют в лабораторию немедленно, при температуре 22–37 °C. В зимнее время в контейнер помещают грелки (35–40 °C).Хранить при температуре 37 °C 2–3 ч.
Исследование катетеров
Взятие материала на исследование проводят врач-хирург или медсестра. Область кожи вокруг катетера обрабатывают тампоном с 70 %-ным спиртом. В условиях асептики извлекают катетер и стерильными инструментами отрезают 5 см дистального конца катетера прямо в стерильную пробирку или в стерильную чашку.Кусочки катетера немедленно доставляют в лабораторию, чтобы предотвратить высыхание. Хранить при температуре +4 °C в течение 24 ч.
Глава 3 Лабораторные методы исследования в гематологии
Кровь и ее компоненты
Методы исследования компонентов крови
Кровь представляет собой жидкость сложного состава – плазму, в которой суспензированы форменные элементы: эритроциты (RBC), лейкоциты (WBC) и тромбоциты (PLT). При коагуляции крови после отделения сгустка остается жидкость, которая называется сывороткой. Из методов количественного и качественного исследования форменных элементов крови наиболее распространен общеклинический анализ крови: определение концентрации гемоглобина, цветового показателя, содержания эритроцитов, лейкоцитов, лейкоцитарной формулы, описание особенностей морфологической картины клеток крови, оценка скорости оседания эритроцитов. Дополнительно определяют количество ретикулоцитов и тромбоцитов. Эти исследования проводят всем стационарным больным и по показаниям – амбулаторным. Нередко ограничиваются недостаточно информативным определением количества гемоглобина, лейкоцитов и СОЭ (так называемая «тройка»).
Взятие и обработка крови
Исследование рекомендуется проводить утром натощак или через 1 ч после легкого завтрака. Кровь для проведения общего клинического анализа берут у пациента из пальца, вены или из мочки уха, а у новорожденных – из пятки. Не рекомендуется брать кровь после физической и умственной нагрузки, применения медикаментов, особенно при внутривенном или внутримышечном их введении, воздействия рентгеновских лучей и после физиотерапевтических процедур. В экстренных случаях этими правилами пренебрегают.
Взятие капиллярной крови
Капиллярную кровь получают с помощью прокола: 1 – мякоти концевых фаланг пальцев рук, 2 – мочки уха, 3 – у новорожденных – пятки или большого пальца ноги. Прокол должен быть глубокий, около 3–4 мм. Не следует брать кровь из воспаленных или поврежденных участков. Если место предполагаемого прокола холодное и цианотичное, его предварительно согревают массированием или погружением конечности в теплую воду. Кожу обрабатывают 70 %-ным этиловым спиртом и затем прокалывают. Первую каплю снимают ватным тампоном. Из следующих капель крови при легком надавливании быстро набирают необходимое количество крови. Кровь с поверхности пальца набирается индивидуальным стерильным капилляром Панченкова.
Заранее наливают в пробирки соответствующие реактивы: для определения СОЭ – в капилляр Панченкова набирают 25 мкл (до метки 75) реактива 1; для определения концентрации гемоглобина – 5 мл реактива 2; для подсчета числа эритроцитов – 4 мл реактива 3; для подсчета числа лейкоцитов – 0,4 мл реактива 4.Гемоглобин (НВ)
Гемоглобин – основной дыхательный пигмент эритроцитов, относящийся к хромопротеидам и обеспечивающий ткани кислородом; состоит из белка – глобина и гема – соединения протопорфирина IX с железом. Последний придает гемоглобину характерную окраску. Присоединение к гему различных химических групп сопровождается изменением окраски, на этом основано и определение концентрации гемоглобина в крови.Исследование содержания гемоглобина в крови (гемоглобинометрия) включает определение гемоглобина и его дериватов, которые присутствуют в крови здоровых людей или появляются при различных патологических состояниях. У здоровых людей гемоглобин в крови находится главным образом в виде оксигемоглобина, восстановленного гемоглобина и в небольшом количестве – метгемоглобина, карбоксигемоглобина и вердоглобина.
Нормальные величины
У здоровых людей концентрация гемоглобина в крови составляет:
1) мужчины – 132–164 г/л;
2) женщины – 115–145 г/л;
3) новорожденные – 135–195 г/л;
4) дети 1 года – 110–130 г/л;
5) дети 10–12 лет – 115–145 г/л.Дневные колебания: значения гемоглобина минимальны утром и максимальны вечером.
Клиническое значение
Снижение концентрации гемоглобина в крови является основным лабораторным симптомом анемии. При этом содержание гемоглобина варьирует в широких пределах в зависимости от формы анемии и ее степени. Следует, однако, иметь в виду, что диагностика анемии ни в коей мере не может быть проведена лишь на основании определения концентрации гемоглобина в крови. Это исследование устанавливает только факт наличия анемии. Для уточнения ее характера необходимо исследование количества эритроцитов, цветового показателя, других расчетных индексов эритроцитов, морфологии эритроцитов.Повышение концентрации гемоглобина в крови может наблюдаться при миелопролиферативных заболеваниях и симптоматических эритроцитозах, сопутствующих различным состояниям. Среди миелопролиферативных заболеваний наиболее характерно повышение гемоглобина при эритремии. Симптоматические реактивные эритроцитозы могут быть абсолютными (обусловлены пролиферацией элементов эритропоэза) и относительными (гемоконцентрационные). Физиологическое увеличение содержания гемоглобина свойственно новорожденным.
Фракции гемоглобина
Существуют физиологические и патологические виды гемоглобина. К физиологическим относят три основных типа гемоглобина: примитивный – Р; фетальный – F; взрослый – А.