Возбудителем является бледная спирохета Treponema pallidum. За последнее время сифилис принял форму эпидемии со значительным увеличением зараженных беременных и рождением детей с явлениями врожденного сифилиса. Выделяют первичный сифилис с формированием очага первичного поражения, представляющего собой место проникновения возбудителя. Шанкр (или первичный очаг) купируется без лечения от 3 до 6 недель, и заболевание переходит во вторичную стадию. Вторичный сифилис – системное заболевание, длящееся 2–6 недель. Во время этих двух стадий заболевания трепонемы активно размножаются, соответственно наиболее вероятна передача болезни партнеру. Далее заболевание переходит в латентную фазу без клинических проявлений. Третичный сифилис развивается у 30 % больных при отсутствии лечения и проявляется прогрессирующим повреждением ЦНС, костно-мышечной системы, внутренних органов (образование гумм характерно для позднего, третичного сифилиса). В латентной фазе сифилис не передается половым путем, но вероятна трансплацентарная передача плоду. Спирохеты проникают через плаценту к плоду на 8-й неделе беременности, но клинические проявления у плода могут появиться лишь после 16 недель, когда возможна реакция иммунной системы. Из-за огромного количества трепонем в крови матери при первичном и вторичном сифилисе наиболее вероятна передача заболевания плоду. Инфицирование плода происходит в 100 % случаев, а клиническая симптоматика врожденного сифилиса отмечается в 50 %.
Микроскопия . Наилучший метод исследования на бледную трепонему – исследование ее в свежем состоянии в темном поле зрения. Преимуществом этого способа является то, что материал исследуется быстро в нативном состоянии, трепонемы легче удается найти благодаря их особым движениям и характерной морфологии. В темном поле зрения бледная трепонема выглядит как нежная спираль, освещенная розовым светом, слабо блестит, тонкая. Движения ее плавные, изредка она изгибается под углом, особенно характерно маятникообразное движение. Завитки равномерны по толщине, высота их несколько меньше по концам, верхушки закруглены. Свое название бледная трепонема получила из-за слабого прокрашивания большинством красок. Но окраска по Романовскому – Гимзе помогает отличить бледную трепонему от других форм трепонем. При этом методе бледная трепонема окрашивается в нежно-розовый цвет, а другие спирохеты – в более темный цвет с синим или фиолетовым оттенком. Исследование в темном поле и проводимая в комплексе с ним прямая проба с флуоресцирующими антителами являются важными методами диагностики раннего сифилиса и применяются при первичном и вторичном сифилисе. Пробы для исследования берутся из очага поражения – шанкра или проявлений вторичного сифилиса.
Серологические реакции . Подразделяются на два типа: специфические для антител против трепонем и неспецифические для антител типа реагин. Реакция Вассермана относится к первому типу и в основном используется для скрининга заболевания. Несмотря на то что РВ не является высокочувствительным и специфичным тестом, повышенный титр антител (более 1: 16) указывает на активный сифилис.
При положительной реакции с неспецифическими тестами для подтверждения диагноза применяются специфические методики. К этим реакциям относятся тест иммобилизации трепонем, тест абсорбции специфических флуоресцирующих антител, тест микрогемагглютинации. Лишь через 4–6 недель после начала заболевания все серологические тесты становятся положительными. К ложноположительным результатам неспецифических тестов приводят вирусная инфекция, аутоиммунные заболевания, употребление наркотиков и сама беременность, а также состояние после употребления спиртных напитков. Однако данная реакция бывает чаще всего слабой. На настоящий момент в России используется комплекс серореакций (КСР), включающий в себя реакции микропреципитации (РМП) с кардиолипиновым антигеном, модификации реакции связывания комплемента с кардиолипиновым и трепонемным антигенами, реакции иммунофлюоресценции (РИФ) и ее модификации и реакцию иммобилизации бледных трепонем (РИТ). В последние годы разработаны показания к использованию нового КСР: иммуноферментного анализа или реакции пассивной гемагглютинации в комплексе с РМП. Разрабатываются методики, позволяющие провести диагностику раннего сифилиса, а также врожденного заболевания, оценку эффективности терапии, рецидивов инфекционного процесса, что связано с выявлением IgM, и детекции антигена бледной трепонемы при нейросифилисе и серорезистентности. Новый серологический комплекс более специфичен и чувствителен, легко воспроизводим, быстро исполняется, менее субъективен в учете результатов и помогает автоматизировать процесс постановки диагноза и получить достоверные результаты.
При диагностике врожденного сифилиса кровь из пуповины может давать положительную реакцию по данным неспецифических тестов. Эта реакция может являться следствием присутствия специфических антител у плода, доставшихся ему от матери (IgG), или являться проявлением его собственного инфицирования (IgM). Диагностика этих типов антител представляет большие трудности. В случае, если серопозитивность новорожденного является следствием перехода IgG от матери, титры антител в РВ неуклонно снижаются и исчезают в пределах 3 месяцев жизни. Любой новорожденный, имеющий положительную РВ при отсутствии клинических проявлений сифилиса, должен быть обследован с использованием этого теста ежемесячно на протяжении 9 месяцев. Резкий подъем титра антител говорит об активном сифилисе и необходимости срочного лечения.
Ультразвуковое исследование плода . При врожденном сифилисе могут выявляться признаки неиммунной водянки плода, гепатоспленомегалия, увеличенная плацента, периодическая непроходимость кишечника.
Пункция спинномозговой жидкости. При раннем (до 1 года) сифилисе, учитывая хорошие результаты лечения, спинномозговая пункция не проводится. При продолжительности заболевания более 1 года рекомендуется спинномозговая пункция. Такие результаты, как повышение концентрации белка с плейоцитозом и положительная реакция Вассермана, говорят об активном нейросифилисе. Диагноз нейросифилиса выставляется на основании комбинации серологических тестов и результатов исследования спинномозговой жидкости (к примеру, количество лейкоцитов в 1 мм3, превышающее 5, указывает на активный нейросифилис).
Донованоз
Донованоз (венерическая гранулема) – это язвенное слабоконтагиозное хроническое заболевание, поражающее кожу и лимфатические узлы перианальной и генитальной областей. Отмечен половой путь передачи заболевания микроорганизмами, которые распознаются как тельца Донована. Эти микроорганизмы, известные как Calymmatobacterium granulomatis, по количеству своих антигенов похожи на клебсиеллы. Однако необходимо отметить, что до настоящего момента точно не известно, являются ли эти тельца возбудителем данного заболевания. Исследования телец Донована выявляют их морфологическую схожесть с грамотрицательными бактериями. Донованоз особенно распространен в Новой Гвинее, Карибском бассейне, в Африке и среди индусов в Индии. Распространяется в основном половым путем, о чем говорят возрастная специфичность, частое сочетание с сифилисом, поражение половых органов у гетеросексуалов и аноректальной области у активных гомосексуалистов. Инкубационный период колеблется до 3 месяцев, но первые признаки заболевания появляются в течение 1 месяца после полового контакта с больным.
Признаки заболевания представлены папулами, безболезненными при пальпации, расположенными в области половых органов и ануса, которые затем разрушаются без паховой аденопатии. Встречается поражение полости рта.
Гистологическое исследование при донованозе выявляет выраженный акантоз и псевдоэпителиоматозную пролиферацию. В дерме обнаруживаются воспалительные инфильтраты, состоящие в основном из плазматических клеток и гистиоцитов. Несмотря на то что исследование импрегнации серебром позволяет эффективно выявлять специфические тельца в срезах, диагноз чаще всего удается установить при исследовании мазков, приготовленных из материала, полученного при биопсии грануляционной ткани с периферии очага. Кусочки материала растирают между стеклами, высушивают, в качестве фиксатора используют метиловый спирт и окрашивают по Райту– Гимзе. Тельца Донована обнаруживаются в виде округлых коккобацилл размером от 1 до 2 мкм, располагающихся в цитоплазме больших мононуклеарных клеток. Капсула окрашивается как плотная ацидофильная зона, которая благодаря краевому скоплению хроматина напоминает английскую булавку. Патогномоничная мононуклеарная клетка – от 25 до 90 мкм в диаметре и имеющая в цитоплазме многочисленные кистозные полости со специфическими тельцами Донована.
Культуральный метод используется редко. Материал с места поражения культивируется на желточных мешках куриных эмбрионов, а затем происходит гистологическая идентификация возбудителя.
Лабораторные методы : методика ПЦР на настоящий момент до конца не разработана и нуждается в дальнейшей апробации с использованием материала из различных географических зон.
Хламидиоз
Хламидиоз вызывается Chlamydia trachomatis – наиболее распространенным из микроорганизмов, передающихся половым путем. Вид C. trachomatis имеет 15 серотипов. Серотипы A, B, Ba и C вызывают трахому, три из них – L1, L2, L3 – венерическую лимфогранулему (ВЛГ), остальные серотипы (D – K) вызывают воспалительные заболевания гениталий и перинатальные инфекции. Хламидии характеризуются особым жизненным циклом, начинающимся с поражения чувствительных клеток путем специфического процесса поглощения хламидий клетками хозяина. Первый шаг инфекционного процесса – прикрепление элементарного тельца-хламидии (ЭТ) к клетке хозяина. В основном поражается нереснитчатый цилиндрический или кубический эпителий. После прикрепления следует вызываемый ЭТ фагоцитоз. Внутри клетки ЭТ находится в цитоплазме в виде фагосомы, а поверхностные антигены микроба задерживают распад фагосомы. Далее ЭТ видоизменяется в метаболически активное сетчатое тельце (СТ), способное к делению. СТ неинфекционно и существовать вне клетки не может. СТ делятся 8-24 ч, конденсируются и преобразуются в новые ЭТ. Через 3 суток клетка разрушается, и ЭТ распространяются во внешнюю среду. Так начинается новый этап размножения хламидий. У мужчин первично поражается уретра, следом – другие органы (предстательная железа, семенные пузырьки, придатки яичек). Наиболее распространен первичный хламидийный уретрит, причем около 20 % мужчин не имеют клинических симптомов заболевания. У женщин чаще поражается канал шейки матки, а за этим может возникнуть и восходящая инфекция, поражающая матку, маточные трубы, яичники. Хламидийная инфекция может поражать шейку матки и уретру одновременно. Инфекция из мочеиспускательного канала может проникать в мочевой пузырь, вызывая цистоуретрит.
Культуральный метод является стандартом. Для транспортировки применяется среда (сукрозосульфат), которая содержит антибиотики: нистатин, ванкомицин, гентамицин. Среда с пробой остается охлажденной, посев в среду культивирования рекомендуется провести в пределах суток. Культура клеток (Мак-Коя) с пробой хранится от 24 до 72 ч, а затем проводятся окрашивание (йодом, помеченными флуоресцином моноклональными антителами) и микроскопия. Чувствительность метода – около 70 %, при повторном пассаже через среду культивирования выявляется еще от 10 до 20 % случаев инфицирования.
Серологические реакции регистрируют не саму бактерию, а последствия ее пребывания в организме. Известно, что микроорганизм или его антигенные компоненты могут не выявляться в месте первоначальной инфекции. Но тем не менее при хронической инфекции время от времени высвобождаются антигены хламидий из клеток, в результате чего индуцируется гуморальный ответ и накопление специфических сывороточных антител, которые выявляются следующими исследованиями: реакцией связывания комплемента – РСК, иммуноферментным анализом (ИФА), реакцией непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ), реакцией непрямой гемагглютинации (РНГА), непрямым иммунопероксидазным анализом (IPA), реакцией микроиммунофлуоресценции (МИФ).
В основе ИФА-методов лежит обнаружение специфических антител, которые накапливаются в секретах и сыворотке крови организма в процессе иммунного ответа на проникновение возбудителя инфекционного заболевания. При исследованиях установлена высокая степень зависимости между показателем антихламидийных антител в сыворотке крови и реальным наличием хламидийных антигенов в организме. Антитела относятся к следующим классам иммуноглобулиновых молекул: M, G, A. При остром инфекционном процессе у пациентов наблюдаются антитела класса М и быстро увеличивающееся число антител классов A и G. Однако при хроническом течении заболевания выявляются специфические антитела классов A и G, концентрации которых не изменяются в течение продолжительного времени. У пациентов с течением без признаков заболевания выявление антител класса A в низких титрах в течение многих недель говорит о присутствии микробной персистенции. Постоянно низкие титры специфических антител класса G говорят о давно перенесенной хламидийной инфекции. В процессе терапии двух– или трехкратное снижение количества антител классов A и G указывает на ее благополучное проведение.
Показатели специфических антител не свидетельствуют о клинической форме, локализации и течении инфекции. Но отсутствие антител к хламидиям исключает заболевание, а серологические тесты можно применять как метод скрининга у населения с невысокой частотой хламидийной инфекции. В случае положительного теста рекомендуется подтверждение наличия инфекции обнаружением специфического антигена, культуральным методом.
Иммуноцитологические реакции . Выявление специфического антигена является более доступным и быстрым способом диагностики хламидиоза. Существуют два доступных метода выявления антигена хламидий. Это прямое окрашивание флуоресцирующими моноклональными антителами ЭТ в мазках и метод ELISA. Ложноположительные результаты обоих методов не превышают 3 %. При обследовании населения с низкой частотой заболевания (2 %) положительная прогностическая ценность метода составляет 50 %, т. е. положительный результат теста оказывается правильным только в половине случаев.
Методы экспресс-диагностики хламидий : применяются иммунохроматография и ферментспецифическая реакция.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) увеличивает число специфических участков ДНК в 100 тыс. раз и более, делая их доступными для идентификации. Метод считается оптимальным для диагностики хламидиоза у популяций с низким уровнем инфицирования. Его чувствительность и специфичность составляют 100 %.
Цитологический метод, основанный на обнаружении специфических внутриклеточных "включений" в соскобах с эпителия, окрашенных по Папаниколау, используется редко, так как очень неточен, его чувствительность составляет около 20 %. Метод можно рекомендовать только для диагностики хламидийных конъюнктивитов у новорожденных.
Трихомониаз
Это инфекционное заболевание половых органов, которое вызывается влагалищными трихомонадами. Трихомонада – это одноклеточный паразит, относящийся к классу жгутиковых. Имеет грушевидное тело, жгутики и волнообразную мембрану, может активно перемещаться. Образует псевдоподии и проникает в межклеточное пространство. Возбудитель поражает преимущественно участки слизистых оболочек, выстланных плоским цилиндрическим эпителием (эндоцервикс, уретру). Основной путь заражения – половой, это объясняется неустойчивостью трихомонад во внешней среде. Инкубационный период составляет от 3 дней до 4 недель. Урогенитальный трихомониаз выявляется у 70 % женщин, страдающих белями. Наиболее часто поражается влагалище, реже – выводные протоки бартолиновых желез, цервикальный канал, матка, придатки. Это заболевание редко встречается у девочек, учитывая половой путь заражения. Биопсия при урогенитальном трихомониазе производится крайне редко. Однако при морфологическом исследовании выявляется воспалительный инфильтрат с выраженным полнокровием, отеком слизистой и подслизистой оболочек. Воспалительные изменения сопровождаются дистрофией и изъязвлением плоского эпителия.
Кольпоскопия . Часто при кольпоскопии можно видеть эрозии, полипы, точечные кровоизлияния в слизистую шейки матки по типу "клубника" или "укусы блох". Определяется выраженная сосудистая реакция, сосуды реагируют на уксусную кислоту. Пузырьки в выделениях за счет углекислого газа имеют примерно одинаковую величину и сине-фиолетовый цвет.
Микроскопия . У женщин материал для исследования берут из всех подозрительных участков и прежде всего – из влагалища и уретры, у мужчин – из мочеиспускательного канала. Полученный материал рекомендуется исследовать в свежем и окрашенном состоянии. Целесообразно проводить посевы на питательные среды. В неокрашенных препаратах трихомонада имеет вид грушевидного тела размером немного больше лейкоцита с характерными толчкообразными движениями. При исследовании в темном поле зрения хорошо видны жгутики. Окрашенные метиленовым синим трихомонады имеют протоплазму с ячеистым строением, эксцентрически расположенное удлиненное ядро, жгутики не видны. Хорошо определяются маленькая ротовая щель (цитостом), многочисленные пищеварительные вакуоли, наполненные заглоточным материалом (микробами, лейкоцитами, эритроцитами, сперматозоидами). В окрашенных синью или по Граму препаратах трихомонады представляются разной величины и формы – круглые, овальные, грушевидные, контуры хорошо прорисовываются, протоплазма синего цвета или при окраске по Граму – красноватого. Ядро овальной формы, иногда с заостренными концами, сходное с косточкой сливы, расположено эксцентрически и окрашено более интенсивно, чем протоплазма.
Культуральный метод . Культивирование трихомонад не является сложным, но необходимы специальные среды, такие как Дайамонда, Купферберга. Выделения (можно использовать осадок мочи) помещаются в питательный бульон, который инкубируется. В течение 5 дней ежедневно капля среды рассматривается под микроскопом до обнаружения подвижных трихомонад. Несмотря на точность, метод культуры применяется редко.
Серологические исследования . В последние годы появились новые методы: иммуносорбция (ELISA), моноклональные антитела, латекс-агглютинация, которые определяют растворимые антигены в концентрации от 50 нг/мл. Этот метод применяется для выявления хронических форм трихомониаза, бессимптомного трихомонадоносительства. Но их недолгое использование не дает возможности окончательно говорить об их надежности.
Бактериальный вагиноз