Благодаря высокой точности определения появилась возможность поиска возбудителей болезней практически в любом биологическом материале. Сегодня методу ПЦР-анализа подвергаются:
• соскоб эпителиальных клеток (соскоб из уретры у мужчин и у женщин, соскоб из цервикального канала);
• кровь, плазма, сыворотка крови;
• биологические жидкости (сок простаты, плевральная, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкости, слюна);
• моча;
• мокрота;
• биопаты желудка и двенадцатиперстной кишки;
• слизь и другие биологические выделения.
Достоинства метода
• Высокая специфичность за счет того, что искомые кусочки генетического материала имеют уникальные последовательности ДНК.
• Высокая чувствительность за счет многократного размножения исходного материала.
• Универсальность – при правильном подходе может быть проанализирован любой материал.
• Быстрое получение результата (в отличие от бактериологических методов, где результата приходится ждать довольно долго).
• Возможность одновременной диагностики многих возбудителей (анаэробов и аэробов; вирусов, бактерий и грибов).
• Для некоторых микроорганизмов ПЦР является практически единственным методом диагностики (например, для Mycoplasma genitalium).
ПЦР – анализ может быть качественный и количественный – т. е. может просто свидетельствовать о наличии того или иного возбудителя, а может и давать информацию о количественном содержании возбудителя в тех или иных биологических материалах.
Как правильно подготовиться к ПЦР-анализу
Достоверность результатов лабораторной диагностики ПЦР зависит не только от опыта и профессионализма врача-лаборанта, возможностей данной лаборатории, но и от того, соблюдал ли пациент рекомендации врача, насколько правильной была его подготовка к проведению анализа. При сдаче анализа методом ПЦР врачи рекомендуют соблюдать следующие правила:
• за сутки до проведения анализа не жить половой жизнью;
• сдача ПЦР-анализа крови проводится натощак, т. е. необходимо ничего не есть, не пить и не жевать жвачку;
• для ПЦР-анализа мочи используется первая утренняя порция, собранная в чистый, стерильный контейнер.
ПЦР-анализы
В устоявшейся клинической практике ПЦР-анализы обычно сдают «блоками [16] » на определенные группы возбудителей.
Например:
• ПЦР-диагностика инфекций, передаваемых половым путем, где одновременно выявляются:
– бактериальные инфекции: Chlamydia trachomatis (хламидия), Mycoplasma hominis (микоплазма человека), Gardnerella vaginalis (гарднерелла), Mycoplasma genitalium (микоплазма генитальная), Ureaplasma parvum (уреаплазма парвум), Ureaplasma urealyticum (уреаплазма уреалитикум), Neisseria gonorrhoeae (гонококки);
– вирусные инфекции: HPV (Human Papillomavirus, папилломавирус человека) типы 16, 31, 33, 35Н, 52, 58, 67; типы 18, 45, 39, 59; тип 6, 11; тип 26, 51;
– инфекции, вызванные простейшими: Trichomonas vaginalis – трихомонады;
– грибковые инфекции: Candida albicans – кандида;
• ПЦР-диагностика бактериальных инфекций:
– бруцеллы: Brucella species вызывает заболевания дыхательных путей, мочевыделительной системы, органов половой сферы и опорно-двигательного аппарата;
– гемофилы: к настоящему времени известно 9 видов гемофил, вызывающих инфекции у человека. Haemophilus ducrei вызывает инфекции, передающиеся половым путем (симптомы – обильные водянистые, периодически гноевидные выделения с неприятным запахом из половых путей, дизурические явления). Haemophilus speciec вызывает заболевания дыхательных путей (симптомы – поражение дыхательных путей; кашель с мокротой; повышение температуры тела; слабость, недомогание);
– кампилобактерии: Campulobacter species вызывает воспалительные заболевания половых органов у женщин и мужчин со следующими симптомами:
· дизурические явления (небольшие рези при мочеиспускании);
· слизисто-гнойные выделения из половых путей;
· тянущие боли внизу живота;
– листерии: Listeria monocytogenes вызывает заболевания отделов малого таза, мочевыводящих путей, суставов, органов дыхания со следующими симптомами:
· слизисто-гнойные выделения из половых путей;
· боли внизу живота;
· отек суставов, боли в суставах;
· кашель с мокротой;
· дизурические явления;
– микобактерии туберкулеза: развитие туберкулезной инфекции вызывают 4 вида микобактерий: Mycobacterium tuberculosis; Mycobacterium bovis; Mycobacterium africanum; Mycobacterium microti. Однако в патогенезе туберкулеза у человека ведущая роль принадлежит именно Mycobacterium tuberculosis. Во всем мире каждый год регистрируют около 8 миллионов новых случаев этого тяжелого заболевания, около 3 миллионов человек ежегодно умирает от туберкулеза.
– микоплазмы: внутриклеточные микробы, очень широко распространены в природе. Уреаплазмы – это особая и наиболее «популярная» разновидность патогенных для человека микоплазм. На их долю приходится большая часть хронических микоплазмозов человека. Кроме уреаплазм известно еще несколько видов безусловно патогенных для человека видов: Mycoplasma species, Mycoplasma pneumonia, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum. Наиболее часто патогенными видами микоплазм поражаются:
· мочеполовые органы: пиелонефрит, уретрит, нарушение овуляции и сперматогенеза;
· сердечно-сосудистая система: артериальная гипотензия (гипотония), кардит, перикардит;
· органы пищеварения: невирусный гепатит, гастрит, холецистит, кишечные дисфункции (упорные диареи);
· респираторные органы: ОРЗ, хронический ринит, атипичная пневмония (не путать с азиатской «атипической пневмонией»!);
· суставы: ревматоидный артрит, подагра;
· центральная и периферическая нервная система: неврастении, невралгии, локальные болевые синдромы и, по некоторым данным, демиелинизирующие заболевания;
· кожа и слизистые оболочки: повышенная ломкость и проницаемость капилляров, вульгарные угри, простой герпес (микоплазмы принимают участие в транспорте вируса);
– нейссерии: для человека патогенными являются Neisseria gonorrhoeae и Neisseria meningitides, также у человека выделяют непатогенные виды N. sicca, N. mucosa, N. perflava. Neisseria gonorrhoeae является возбудителем специфического венерического заболевания – гонореи;
– стрептококки: большинство стрептококков входят в состав нормальной микрофлоры дыхательных, мочевых, половых путей и ЖКТ, но некоторые их виды имеют важное значение как возбудители болезней человека:
· стрептококки группы А (Streptococcus pyogenes) вызывают ангину – одну из самых распространенных среди детей школьного возраста инфекций, а также широко известные постинфекционные заболевания – ревматизм и острый гломерулонефрит;
· стрептококки группы В (Streptococcus agalactiae) – основные возбудители сепсиса и менингита у новорожденных, послеродового сепсиса и эндометрита;
– трепонема: Treponema pallidum– возбудитель сифилиса)
– хеликобактер пилори: установлена четкая связь Helicobacter pylori с развитием гастрита, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, рака желудка и многих других заболеваний.
• ПЦР-диагностика вирусных гепатитов, герпеса и других вирусных инфекций:
– вирус Эпштейн-Барр (из семейства герпесвирусов) вызывает легкое заболевание у детей и инфекционный мононуклеоз у неиммунизированных подростков и взрослых, является вездесущей вирусной инфекцией и присутствует практически у 100 % популяции людей. Чаще всего заражение им происходит в раннем детском и в юношеском возрасте, поэтому более 90 % взрослых уже перенесли эту инфекцию в той или иной форме и имеют антитела к вирусу Эпштейн-Барр;
– герпес: самая распространенная вирусная инфекция. Около 90 % людей на земле инфицированы герпесом. Только у 5 % инфицированных проявляются симптомы болезни, у остальных она протекает без клинических проявлений. Наиболее часто вирус поражает: глаза (конъюнктивит, кератит), слизистую губ, слизистые оболочки половых органов, центральную нервную систему (энцефалит, менингит). У беременных женщин вирус может вызвать патологию беременности, самопроизвольные аборты, преждевременные роды;
– вирусные гепатиты – это гепатиты, вызванные вирусной инфекцией: А, В, С, G;
– цитомегаловирус: это целая группа вирусов, которые могут присутствовать в любой жидкости организма человека (кровь, моча, слюна, сперма, секрет влагалища, грудное молоко и т. д.). Цитомегаловирус во многом схож с вирусом простого герпеса, поэтому его относят к разновидности герпетических инфекций. Цитомегаловирус как болезнь может развиться в результате ослабления защитных реакций организма: на фоне сильных стрессов, гриппа, обострения хронических заболеваний, осложнений беременности;
– другие вирусные инфекции: ВИЧ, вирус Варицелла-Зостер, энтеровирус;
• ПЦР-диагностика острых кишечных и респираторных инфекций:
– респираторные инфекции: аденовирусы, грипп А и В, на РНК вируса гриппа A, A/H1N1/CA/2009 (анализ на свиной грипп)]
– вирусные кишечные инфекции: астровирус, норовирусы 1-го и 2-го типов, ротавирусы АиС, саповирус;
– бактериальные кишечные инфекции: Е. Coli (энтеротоксигенные штаммы), Shigella (геморрагические штаммы), Salmonella typhi, Salmonella species, Yersinia enterocolitica, Yersinia pseudotuberculosis.
Часть VII План обследования при различных состояниях и заболеваниях
Глава 19 Общие исследования
Профилактический осмотр
Рекомендуемая периодичность обследования – 1 раз в год.
• Общий анализ крови с лейкоцитарной формулой
• СОЭ
• Общий анализ мочи
• АЛТ
• ACT
• Альбумин
• Амилаза
• С-реактивный белок
• Билирубин (общий)
• Глюкоза крови
• Креатинин
• Мочевина
• Общий белок
• Холестерин общий
• ВИЧ
• Гепатит С, anti-HVC сум.
• Гепатит В, HBsAg
Лабораторные исследования, проводимые всем пациентам
• Общий анализ крови с лейкоцитарной формулой
• СОЭ
• Глюкоза крови
• Общий анализ мочи
• Анализ на сифилис – реакция Вассермана или ИФА
• ВИЧ
Комплексное обследование ребенка
• Общий анализ крови с лейкоцитарной формулой
• Общий анализ мочи
• Общий белок
• Билирубин общий
• АЛТ
• ACT
• Альбумин
• Амилаза
• Мочевина (кровь)
• Мочевая кислота (кровь)
• Глюкоза крови
• Креатинин
• ЛДГ (лактатдегидрогеназа)
• Щелочная фосфатаза
• С-реактивный белок (ультрачувствительный)
• Триглицериды
• Холестерин (общий, ЛПВП, ЛПНП)
• Железо сывороточное
• Кальций общий
• Глобулин
• Протромбиновое время (МНО)
• Фибриноген
• Кортизол
• СТГ (соматотропный гормон)
• ТТГ (тиреотропный гормон)
• Т4 свободный
• Антитела к антигенам гельминтов (трихинелла, описторхия, эхинококк, токсокары)
• Антитела к тиропероксидазе (АТ-ТПО)
Общее обследование женщин с 30-летнего возраста
Рекомендуемая периодичность обследования – 1 раз в год.
• Общий анализ крови с лейкоцитарной формулой
• СОЭ
• Общий анализ мочи
• АЛТ
• ACT
• Билирубин (общий)
• Протромбиновое время
• Протромбиновый индекс
• Глюкоза крови
• Креатинин
• Мочевина
• Общий белок
• Холестерин общий
• Ферритин
• ТТГ
• Лютеинизирующий гормон (ЛГ)
• Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ)
• Гинекологический мазок на флору
• Цитологический мазок
Общее обследование мужчин с 35-летнего возраста
Рекомендуемая периодичность обследования – 1 раз в год.
• Общий анализ крови с лейкоцитарной формулой
• СОЭ
• Общий анализ мочи
• АЛТ
• ACT
• Общий белок
• Креатинин
• Мочевина
• Билирубин (общий)
• Глюкоза крови
• Холестерин общий
• Урологический мазок на флору
• ПСАобщий
• Тестостерон
Общее обследование женщин с 50-летнего возраста
Рекомендуемая периодичность обследования – 1 раз в год.
• Общий анализ крови с лейкоцитарной формулой
• СОЭ
• Общий анализ мочи
• АЛТ
• ACT
• Общий белок
• Белковые фракции
• Амилаза
• Билирубин общий
• Глюкоза крови
• Гликолизированный гемоглобин
• Креатинин
• Мочевина
• Na, К, Cl сыворотки крови
• С-реактивный белок
• Холестерин общий
• Трансферрин
• ТТГ
• Т4 свободный
• Пролактин
• СА 15-3
• Cyfra 21-1
• СА 125
• Цитологический мазок
• Кал на скрытую кровь
Общее обследование мужчин с 50-летнего возраста
Рекомендуемая периодичность обследования – 1 раз в год.
• Общий анализ крови с лейкоцитарной формулой
• СОЭ
• Общий анализ мочи
• АЛТ
• ACT
• Общий белок
• Белковые фракции
• Амилаза
• Билирубин общий
• Глюкоза крови
• Гликолизированный гемоглобин
• Креатинин
• Мочевина
• Na, К, Cl сыворотки крови
• С-реактивный белок
• ТТГ
• ПСА общий
• ПСА свободный
• Cyfra 21-1
• Кал на скрытую кровь
Гормональный статус женщины
Рекомендуется при нарушениях менструального цикла, избыточном росте волос, угревой сыпи, при нарушениях в половой сфере, женском бесплодии. Желательно сообщать (для отметки в карточке пациента) день менструального цикла при сдаче анализа.
Рекомендуемая периодичность обследования – 1 раз в 3 года.
• Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ)
• Лютеинизирующий гормон (ЛГ)
• Пролактин
• Эстрадиол
• Прогестерон
• Хорионический гонадотропин человека (β-ХГЧ)
• ДГА-S (дегидроэпиандростерон-сульфат)
• Тестостерон
• Кортизол
• ТТГ
• 17-кетостероидыв моче (17-КС)
• Андростендион
• ГСПГ (глобулин, связывающий половые гормоны)
Гормональный статус мужчины
Рекомендуется при нарушениях роста волос на коже головы, угревой сыпи, мужском бесплодии, при увеличении молочных желез и наличии выделений из них.
Рекомендуемая периодичность обследования – 1 раз в 3 года.
• Тестостерон
• Андростендион
• ТТГ
• ДГА-S (дегидроэпиандростерон-сульфат)
• Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ)
• Лютеинизирующий гормон (ЛГ)
• Пролактин
• Кортизол
• Хорионический гонадотропин человека (β-ХГЧ)
• ГСПГ (глобулин, связывающий половые гормоны)
Госпитализация в стационар общего профиля
• Общий анализ крови с лейкоцитарной формулой
• СОЭ
• Общий анализ мочи
• Группа крови
• Резус-фактор
• ВИЧ
• Сифилис, ТРНА
• Гепатит В, HBsAg
• Гепатит С, anti-HVC сум.
• Возбудители кишечной группы
• Посев из зева и полости носа на дифтерию
Госпитализация в хирургический стационар
• Общий анализ крови с лейкоцитарной формулой
• СОЭ
• Общий анализ мочи
• Группа крови
• Резус-фактор
• Время свертывания
• Время кровотечения
• ВИЧ
• Сифилис (ТРНА)
• Гепатит В, HBsAg
• Гепатит С, anti-HVC сум.
• Возбудители кишечной группы
• Посев из зева и полости носа на дифтерию
Онкологическое обследование женщин
Данный план обследования рекомендован специалистами ВОЗ для регулярного проведения женщинам после 30 лет, особенно при злоупотреблении курением (более пачки сигарет в день), а также лицам, родственники которых страдали онкологическими заболеваниями.
• РЭА или раково-эмбриональный антиген
• СА 19-9
• СА 125
• СА 15-3
• СА 72-4
• Cyfra 21-1
• Хорионический гонадотропин человека (β-ХГЧ)
• Альфа-фетопротеин (АФП)
Онкологическое обследование мужчин
Данный план обследования рекомендован специалистами ВОЗ для регулярного проведения мужчинам после 40 лет, особенно при злоупотреблении курением (более пачки сигарет в день), а также лицам, родственники которых страдали онкологическими заболеваниями.
• РЭА или раково-эмбриональный антиген
• СА 19-9
• ПСА общий
• ПСА свободный
• СА 72-4
• Cyfra 21-1
• Хорионический гонадотропин человека (β-ХГЧ)
Глава 20 Исследования по поводу различных неинфекционных заболеваний
Анемия
• Общий анализ крови с лейкоцитарной формулой
• СОЭ
• Общий белок
• Ретикулоциты
• Цветной показатель
• Сывороточное железо
• Железосвязывающая способность сыворотки
• Фолиевая кислота
• Витамин В12
• Ферритин
• Эритропоэтин
Артериальная гипертония
• Общий холестерин, ЛПВП, ЛПНП
• Лептин
• Протромбиновое время
• Протромбиновый индекс
• Фибриноген
• Ренин
• Ангиотензин
• Альдостерон
• К, Na, Cl сыворотки
• Магний
• Кортизол
• Адреналин
• Норадреналин
• АКТГ
• ТТГ
Атеросклероз
• Общий холестерин, ЛПВП, ЛПНП
• Липопротеин
• Гомоцистеин
• Лептин
Болезни щитовидной железы
По мнению большинства источников, заболевания щитовидной железы занимают в настоящее время первое место среди заболеваний желез внутренней секреции. Нарушение функций щитовидной железы зачастую скрывается под маской различных состояний и заболеваний.
• ТТТ
• Т4
• Т4 свободный
• ТЗ
• ТЗ свободный
• Тиреоглобулин
• Тироксинсвязывающий глобулин
• Тест поглощения тиреоидных гормонов
• Антитела к тиреоглобулину (АТ-ТГ)
• Антитела к тиропероксидазе (АТ-ТПО)
• Кальцитонин
Настороженность на заболевания щитовидной железы
Обследование позволяет провести предварительную оценку состояния и функции щитовидной железы.
• ТТГ
• Т4 свободный
• Тироксинсвязывающий глобулин
• Тест поглощения тиреоидных гормонов
• Антитела к тиропероксидазе (АТ-ТПО)
Заболевания надпочечников
• Адреналин, норадреналин, дофамин
• АКТГ
• Альдостерон
• Ангиотензин
• ДГА-S (дегидроэпиандростерон-сульфат)
• Кортизол
• Ренин
• 17-кетостероидыв моче (17-КС)
• 17-гидроксипрогестерон
Заболевания печени
Для контроля функционального состояния печени (злоупотребление алкоголем, перенесенная малярия, нерациональный режим питания) рекомендуется подобное обследование 1 раз в год.